Filariasis IgG / IgM การทดสอบโรคติดเชื้อเทปตัวอย่างเลือดด้วยบัฟเฟอร์

Filariasis IgG / IgM การตรวจเลือดโรคติดเชื้อ เทป 4 มม. พร้อมบัฟเฟอร์

การใช้งานที่ตั้งใจไว้:

การทดสอบอย่างรวดเร็วของ Filariasis IgG / IgM เป็นอิมมูโนไหลด้านข้างสำหรับการตรวจจับและสร้างความแตกต่างของ IgG และ IgM ปรสิตต้านการอักเสบของน้ำเหลือง (W. Bancrofti และ B. Malayi) ในซีรัมมนุษย์พลาสมาหรือเลือดทั้งหมด การทดสอบนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อใช้ในการตรวจคัดกรองและช่วยในการวินิจฉัยการติดเชื้อปรสิตทางน้ำเหลือง ตัวอย่างปฏิกิริยาใด ๆ ที่มีการทดสอบอย่างรวดเร็วของ Filariasis IgG / IgM ต้องได้รับการยืนยันด้วยวิธีการทดสอบทางเลือก

สรุป:

โรคเท้าช้างต่อมน้ำเหลืองที่รู้จักกันในชื่อว่า Elephantiasis ส่วนใหญ่เกิดจาก W. bancrofti และ B. malayi ส่งผลกระทบต่อประชากรประมาณ 120 ล้านคนใน 80 ประเทศทั่วโลก 1,2,2 โรคนี้แพร่กระจายไปยังมนุษย์โดยการกัดของยุงที่ติดเชื้อภายในซึ่ง microflariae ที่ดูดออกมาจากร่างกายมนุษย์ที่ติดเชื้อจะถูกพัฒนาไปสู่ตัวอ่อนระยะที่สาม โดยทั่วไปแล้วการได้รับตัวอ่อนที่ติดเชื้อซ้ำ ๆ และต่อเนื่องเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการติดเชื้อในมนุษย์

การวินิจฉัยทางพยาธิวิทยาขั้นสุดท้ายคือการสาธิตของ microflariae ในตัวอย่างเลือด 3 อย่างไรก็ตามการทดสอบมาตรฐานทองคำนี้ถูก จำกัด โดยข้อกำหนดสำหรับการเก็บเลือดออกหากินเวลากลางคืนและขาดความไวที่เพียงพอ การตรวจหาแอนติเจนหมุนเวียนนั้นมีให้ใช้ในเชิงพาณิชย์ มันมีประโยชน์สำหรับ W. bancrofti4 นอกจากนี้ microfilaremia และ antigenemia พัฒนาจากเดือนเป็นปีหลังจากได้รับ

การตรวจหาแอนติบอดีเป็นวิธีการเริ่มต้นในการตรวจหาการติดเชื้อปรสิต filarial การปรากฏตัวของ IgM ต่อแอนติเจนปรสิตแนะนำการติดเชื้อในปัจจุบันในขณะที่ IgG สอดคล้องกับการติดเชื้อระยะสุดท้ายหรือการติดเชื้อในอดีต 5 นอกจากนี้การระบุแอนติเจนที่ได้รับการอนุรักษ์จะช่วยให้สามารถทดสอบ 'pan-filaria' ได้ การใช้โปรตีนรีคอมบิแนนต์ช่วยลดการเกิดปฏิกิริยาข้ามกับผู้ที่มีโรคปรสิตอื่น ๆ 6 การทดสอบอย่างรวดเร็วของ Filariasis IgG / IgM ใช้แอนติเจนที่ได้รับการอนุรักษ์เพื่อตรวจจับ IgG และ IgM พร้อมกันกับ W. bancrofti และปรสิต B. malayi โดยไม่มีข้อ จำกัด ในการเก็บตัวอย่าง

หลักการทดสอบ:

การทดสอบอย่างรวดเร็วของ Filariasis IgG / IgM เป็นอิมมูโนแอสเซย์ไหลด้านข้าง เทปทดสอบประกอบด้วย: 1) แผ่นสีคอนจูเกตสีเบอร์กันดีที่บรรจุ recombinant W. bancrofti และ B. malayi แอนติเจนที่พบบ่อยที่ผันด้วยทองคำคอลลอยด์ (Filariasis conjugates) และกระต่าย IgG-gold conjugates, 2) แถบเยื่อหุ้มไนโตรเซลลูโลสที่มีสองแถบทดสอบ แถบ T1 และ T2) และแถบควบคุม (วงดนตรี C) T1 band ถูกเคลือบด้วย IgM ป้องกันโมโนโคลนอลสำหรับการตรวจจับ IgM anti-W. bancrofti และ B. malayi, T2 band นั้นถูกเคลือบด้วยรีเอเจนต์เพื่อตรวจจับ IgG anti-W bancrofti และ B. malayi และวงดนตรี C ถูกเคลือบด้วยกระต่ายต่อต้าน IgG

เมื่อปริมาณตัวอย่างทดสอบที่เพียงพอถูกจ่ายลงในบ่อตัวอย่างของเทปคาสเซ็ตตัวอย่างจะถูกส่งผ่านโดยการกระทำของเส้นเลือดฝอยในเทปคาสเซ็ต W. bancrofti หรือ B. malayi IgM แอนติบอดีหากมีอยู่ในตัวอย่างจะจับกับ Filariasis conjugates อิมมูโนคอมเพล็กซ์จะถูกจับบนเยื่อหุ้มเซลล์โดยแอนติบอดี IgM แอนตี้แอนติ - มนุษย์ซึ่งผ่านการเคลือบล่วงหน้าแล้วก่อตัวเป็นแถบ T2 สีเบอร์กันดีบ่งบอกถึง W. bancrofti หรือ B. malayi IgM ผลการทดสอบในเชิงบวก

W. bancrofti หรือ B. malayi IgG antibodies ถ้ามีอยู่ในตัวอย่างจะจับกับ Filariasis conjugates จากนั้นอิมมูโนคอมเพล็กซ์จะถูกจับโดยรีเอเจนต์ก่อนการเคลือบบนเมมเบรนสร้างแถบสีเบอร์กันดี T1 ซึ่งบ่งบอกถึงผลการทดสอบในเชิงบวกของ W. bancrofti หรือ B. malayi IgG

การไม่มีแถบทดสอบใด ๆ (T1 และ T2) แสดงถึงผลลัพธ์ที่เป็นลบ การทดสอบมีการควบคุมภายใน (วงดนตรี C) ซึ่งควรจะแสดงแถบสีเบอร์กันดีของอิมมูโนคอมเพล็กซ์ของกระต่ายต่อต้านกระต่าย IgG / กระต่าย IgG-gold conjugate โดยไม่คำนึงถึงการพัฒนาสีของแถบทดสอบใด ๆ ไม่เช่นนั้นผลการทดสอบจะไม่ถูกต้องและต้องทำการทดสอบอีกครั้งกับอุปกรณ์อื่น

วิธีการประเมินสินทรัพย์

ขั้นตอนที่ 1: นำชิ้นงานทดสอบและส่วนประกอบทดสอบไปที่อุณหภูมิห้องหากแช่เย็นหรือแช่แข็ง ผสมตัวอย่างให้เข้ากันก่อนที่จะทำการทดสอบเมื่อละลาย

ขั้นตอนที่ 2: เมื่อพร้อมที่จะทดสอบเปิดกระเป๋าที่บากและนำอุปกรณ์ออก วางอุปกรณ์ทดสอบบนพื้นผิวที่สะอาดและเรียบ

ขั้นตอนที่ 3: ตรวจสอบให้แน่ใจว่าได้ติดฉลากอุปกรณ์ด้วยหมายเลขประจำตัวของชิ้นงานทดสอบ

ขั้นตอนที่ 4: สำหรับการตรวจเลือดทั้งหมด

ทาเลือดครบ 1 หยดลงในตัวอย่าง

จากนั้นเพิ่มตัวอย่างเจือจาง 2 หยดทันที

สำหรับการทดสอบซีรั่มหรือพลาสมา

เติมหยดปิเปตด้วยชิ้นงานทดสอบ

จับหยดหยดในแนวตั้งส่งตัวอย่าง 1 หยดลงใน

ตัวอย่างที่ดีทำให้แน่ใจว่าไม่มีฟองอากาศ

จากนั้นเพิ่มตัวอย่างเจือจาง 2 หยดทันที

ขั้นตอนที่ 5: ตั้งค่าตัวจับเวลา

ขั้นตอนที่ 6: ผลลัพธ์สามารถอ่านได้ใน 15 นาที ผลลัพธ์ในเชิงบวกสามารถมองเห็นได้ในเวลาสั้น ๆ 1 นาที

การตีความผล

ข้อดี : * ปรากฏสองบรรทัด เส้นสีหนึ่งเส้นควรอยู่ในขอบเขตของเส้นควบคุม (C) และอีกเส้นสีหนึ่งที่ชัดเจนควรอยู่ในขอบเขตของเส้นทดสอบ (T)

ข้อเสีย: เส้นสีหนึ่งเส้นปรากฏขึ้นในขอบเขตของสายควบคุม (C) ไม่มีบรรทัดปรากฏในพื้นที่ทดสอบ (T)

ไม่ถูกต้อง: สายควบคุมไม่ปรากฏ ปริมาณตัวอย่างไม่เพียงพอหรือเทคนิคการดำเนินการที่ไม่ถูกต้องเป็นสาเหตุที่เป็นไปได้มากที่สุดสำหรับความล้มเหลวของสายควบคุม ทบทวนขั้นตอนและทดสอบซ้ำด้วยการทดสอบใหม่ หากปัญหายังคงมีอยู่ให้หยุดใช้ชุดทดสอบทันทีและติดต่อตัวแทนจำหน่ายในพื้นที่ของคุณ

ประสิทธิภาพ

1. ประสิทธิภาพเชิงเส้นสำหรับการทดสอบ IgM

24 ตัวอย่างจากผู้ป่วยโรคเท้าช้างเหลืองเฉียบพลันและ 200 ตัวอย่างจาก

ภูมิภาคที่ไม่ใช่โรคเท้าช้างถูกทดสอบโดย Filariasis IgG / IgM Rapid Test การเปรียบเทียบสำหรับทุกวิชาแสดงในตารางต่อไปนี้:

ความไวสัมพัทธ์: 95.8%; ความจำเพาะสัมพัทธ์: 100%; ข้อตกลงโดยรวม: 99.6%

2. ประสิทธิภาพทางคลินิกสำหรับการทดสอบ IgG

26 ตัวอย่างจากผู้ป่วยที่เป็นโรคเท้าช้างเหลืองน้ำเหลืองและ 200 ตัวอย่างที่เก็บรวบรวมจากภูมิภาคที่ไม่ใช่โรคเท้าช้างถูกทดสอบโดย Filariasis IgG / IgM Rapid Test การเปรียบเทียบสำหรับวิชาทั้งหมดแสดงในตารางต่อไปนี้:

ความไวสัมพัทธ์: 92.3%; ความจำเพาะสัมพัทธ์: 100%; ข้อตกลงโดยรวม: 99.1%